2024年高考生物一轮复习（新人教版） 第10单元 第6课时 基因工程的基本工具和基本操作程序
第6课时 基因工程的基本工具和基本操作程序
课标要求 1.阐明 DNA 重组技术的实现需要利用限制性内切核酸酶、DNA 连接酶和载体
三种基本工具。2.阐明基因工程的基本操作程序主要包括目的基因的筛选与获取、基因表达
载体的构建、将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测与鉴定等步骤。3.按照实验操作步
骤，进行 DNA 的粗提取与鉴定实验。4.利用聚合酶链式反应(PCR)扩增 DNA 片段并完成电
泳鉴定，或运用软件进行虚拟 PCR 实验。
考点一 重组 DNA 技术的基本工具
1．基因工程的概念
别名 重组
DNA
技术
操作环境 生物体外
操作对象 基因
操作水平 DNA
分子 水平
结果 创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品
2.基因工程的诞生和发展
(1)肺炎链球菌转化实验不仅证明 DNA 是遗传物质，还证明了 DNA 可在同种生物不同个体
之间转移。
(2)DNA 双螺旋结构的提出和半保留复制的证明。
(3)中心法则的确立。
(4)遗传密码的破译。
(5)基因转移载体和限制酶、 DNA
连接酶和逆转录酶 的发现为 DNA 的切割、连接以及功能
基因的获得创造了条件。
(6)DNA
体外重组的实现。
(7)重组 DNA 表达实验的成功。
(8)DNA 测序和合成技术的发明。
(9)PCR
技术的发明。
(10)基因组编辑技术可以实现对特定基因的定点插入、敲除或替换。
3．重组 DNA 技术的基本工具
(1)限制性内切核酸酶(也称“限制酶”)
(2)DNA 连接酶
(3)载体
(1)源于选择性必修 3 P71“旁栏思考”：①原核生物中存在限制酶的意义是什么？
提示 原核生物中限制酶的作用是切割外源 DNA 以保证自身安全，防止外来病原物的危害。
②限制酶来源于原核生物，为什么不能切割自己的 DNA 分子？
提示 原核生物 DNA 分子中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。
(2)源于选择性必修 3 P72“旁栏思考”：DNA 连接酶和 DNA 聚合酶不是(填“是”或“不
是”)一回事。原因是① DNA 连接酶连接的是两个
DNA
片段 ，而 DNA 聚合酶是把单个的
脱氧核苷酸连接到已有的 DNA 片段上。② DNA
聚合酶 起作用时需要以一条 DNA 链为模板，
而DNA
连接酶 不需要模板。
延伸应用 图解限制酶的选择原则
